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檢驗項目服務內容

採檢須知

Serum/Plasma/Culture Supernatant

臨床意義

與自體免疫疾病、不孕症、過敏性疾病、癌症或病毒性感染之免疫監控有關。

輔助型T細胞(Helper T cell,Th)在體內扮演協調免疫的角色,其中的亞群Th1與Th2細胞會產生不同的細胞因子進行免疫調節功能。Th1細胞產生IFN-γ、TNF-α、IL-2,可以增強巨噬細胞殺菌能力以及活化殺手細胞,使體內導向細胞性免疫反應;反之Th2細胞產生IL-4、IL-5、IL-6 及IL-10,可以激發B細胞啟動體液型免疫反應,尤其是IgE的產生,此外透過IL-4、IL-5活化肥胖細胞(mast cell)或嗜伊紅性細胞(eosinophil),在氣喘過敏反應(allergy)上扮演重要的角色。

Th1與Th2- 細胞互為拮抗,Th1細胞釋放的IFN-γ會抑制Th2,Th2細胞的IL-4或IL-10會抑制Th1,當Th1/Th2平衡發生變數時,會影響數種疾病的臨床症狀表現,當Th1過高會與自體免疫疾病、反覆性流產(recurrent reproductive failure)以及試管嬰兒胚胎植入失敗(IVF failure)有關、Th2過高則與過敏性疾病、淋巴腫瘤或癌症相關。

Cytometric Bead Array分析技術原理介紹:
BD™ CBA流式微珠陣列多重分析系統是一種利用流式細胞儀平台,結合以微珠(microsphere)為載體的固相免疫分析技術(Solid phase immunoassay),在單一試管中,同時偵測與分析多種不同待測物的工具。CBA已有「液相晶片 Liquid Array」的美稱,具備了高通量(High-throughput)、低耗時及低單位成本特性,在少量檢體體積下(20~50 uL),每個待測檢體在同一分析試管下最多可完成30種水溶性或細胞內部之蛋白質,包括細胞激素(Cytokines)、細胞趨化素(Chemokines)、生長激素(growth factors)或細胞訊息傳遞蛋白質(Cell signaling proteins)等。細胞儀上機收取數據並以CBA軟體計算濃度。

Cytometric Bead Array技術特點介紹:
傳統ELISA「單孔單項」的方法,所使用的酵素反應容易受溫度或是動力學感受力等因素影響結果,所需的檢體量相當多,此外每一種待測物需分別製作標準曲線,相當耗時,使用CBA「單管多項」的分析法可以解決以上問題,提供高效能的分析,以下為CBA主要的技術特點:

  1. 使用檢體量低,多元平行分析 - 適合分析稀有樣品
    傳統ELISA分析法一次僅能偵測一種待測物,所需的檢體體積量相當多,至少需要600uL以上的檢體量才能定量六種細胞因子,不適合使用在體積量低的檢體,如口腔鼻腔分泌物、CSF或是小型動物檢體;CBA分析法只需50uL的檢體量,即可在同一試管內同時進行檢測。

  2. 高靈敏度、高再現性以及更寬的偵測濃度範圍
    傳統ELISA是使用酵素呈色的偵測方式,靈敏度約5-10 pg/mL,但線性範圍較窄,約5-1000 pg/mL;CBA試劑靈敏度可達5-10 pg/mL,但偵測濃度範圍增加至5-5000 pg/mL,若使用高靈敏度試劑套組,靈敏度甚至可達0.274pg/mL。此外ELISA需進行三重複的檢體偵測,CBA無須進行檢體偵測重覆,因為在同一次上機時,每一顆微珠等同進行檢體重覆偵測。

  3. 偵測物質可彈性組合
    BD CBA套組為預先設計好的微珠套組,可提供穩定的實驗結果,針對不同客戶的研究方向以及實驗需求,亦可自由搭配不同的偵測微珠,提供更彈性的選擇。

  4. 實驗流程簡單,減少相關人為誤差
    傳統ELISA是使用酵素呈色的偵測方式,容易受到不同作用環境及時間等因素影響,且操作時間冗長容易產生人為誤差,CBA實驗系統使用螢光作為偵測方式,實驗步驟簡單,將試劑與檢體混合後約兩三小後即可上機分析。

  5. 自動化分析軟體系統
    利用流式細胞儀可以做即時(real-time)的數據擷取,利用自動化分析軟體可 直接將螢光訊號結果轉換成標準濃度,提供高準確、快速且有效率的新式檢測法。

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